生化分析仪总蛋白试剂携带污染干扰镁测定的排除方法

进进

作者：绍兴市第六人民医院检验科  郑卫波

全自动生化分析仪应用广泛,是目前临床检验必不可少生化检测仪器,但仪器的试剂探针携带污染影响检测结果的准确性。我们在镁离子的实际检测中发现总蛋白试剂常常干扰检查结果,为此将总蛋白程序由单试剂法改为双试剂法,有效的解决了对镁的试剂携带污染问题。

一 、材料和方法

1. 仪器 西门子ADVIA 2400全自动生化分析仪。

2. 试剂 镁试剂(二甲苯胺蓝法)由北京康大泰科公司提供;总蛋白试剂(双缩脲法),包装规格5倍浓缩型,由宁波慈城公司提供。

3. 标本 收集若干份健康体检者血清制成混合血清。

二、方法

1. 总蛋白双试剂测定法的设定 总蛋白试剂盒为单试剂,使用时浓缩液需用去离子水5倍稀释配制成工作液。将总蛋白测定程序由原先的单试剂法设置为双试剂法, 即试剂1(R1)改用去离子水,试剂2(R2)仍为总蛋白浓缩液,R1∶R2为4∶1,其他参数与单试剂测定法相同。

2. 干扰实验 分为对照组和干扰组。(1)对照组:单独测定10次混合血清的镁浓度,计算均值;(2)干扰组:分为2个试验组,即试验组1(测定单试剂法总蛋白后测定镁)、试验组2(测定双试剂法总蛋白后测定镁),各用混合血清重复测定10次。

3. 携带污染率计算 污染率=[(干扰组均值-对照组均值)/对照组均值]×100%。

4. 统计学方法 采用EXCEL 2003软件进行统计分析。镁测定结果采用  ±s表示。组间比较采用配对 t检验。 P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

试验组1镁测定结果明显增高,与对照组比较差异有统计学意义( t=4 .252, P<0.01),携带污染率达33.6%。试验组2与对照组之间差异无统计学意义( t=0 .030, P>0.05),无携带污染。见表1。

表1

三、讨论

全自动生化分析仪试剂探针的残留携带,是造成检测项目间交叉污染,相互影响结果的重要因素[1]。许多含镁的试剂如淀粉酶 (AMY)、肌酸激酶 (CK)、碱性磷酸酶 (ALP)等直接污染[2]可以影响镁的测定。总蛋白试剂不含镁,但含有较高浓度的硫酸铜成分[ 3],铜离子与二甲苯胺蓝的发生显色反应干扰镁的检测结果。为了避免试剂携带污染的发生,目前普遍采取措施是通过调整污染项目测试顺序,增加探针清洗次数,安排在不同仪器或不同模块检测,更换检测方法等[2, 4, 5]。但在日常工作中常受实验条件的限制,检测项目随机性强,以上方法会在一定程度上降低工作效率,增加运营成本。

由于总蛋白与镁的测定是均为单试剂法,残留的总蛋白试剂就可通过R1试剂探针的携带干扰镁离子的结果。本研究使用的是浓缩型的总蛋白试剂盒,使用前需用去离子水稀释。我们将干扰试剂设置为双试剂,干扰试剂成分改由R2试剂探针吸取,而R1试剂探针吸取对镁无干扰的去离子水,由生化分析仪在检测的过程中自行对总蛋白试剂浓缩液进行稀释。此法在不影响总蛋白测定(2种总蛋白测定方法另经方法学的比对)的前提下有效的排除了对镁的携带污染,方法简单方便,不影响工作效率。考虑到改进后的双试剂法总蛋白是否对其他双试剂项目产生干扰,经过试剂交叉污染实验方法[ 2]进行筛查后未发现有携带污染存在。此外,我们在贝克曼LX20生化分析仪进行了同样的实验,获得类似的结果,故值得在其他实验室推广。

参考文献
[1]        宋莲芳, 颜景祥. 自动生化分析仪分析试剂探针污染携带率对检测结果影响的探讨[J]. 现代检验医学杂志, 2003, 18(2): 61.
[2]        于嘉屏. 全自动生化分析仪及其试剂间化学污染对检测结果的影响[J]. 中华检验医学杂志, 2007, 30(11): 1301-1302.
[3]        叶应妩, 王毓三. 全国临床检验操作规程[M]. 第2版. 南京: 东南大学出版社, 1997: 155-288.
[4]        张国伟, 张少锋. 雅培C8000生化分析仪总蛋白试剂的携带污染对血清镁测定的干扰及对策[J]. 检验医学, 2007, 22(6): 749-750.
[5]        王传发. 日立7600生化分析仪检测血清镁中的试剂交叉污染及消除措施[J]. 检验医学, 2010, 25(6): 465-467.