尿液检测方法学的评价

　　【关键词】  尿液检测

　　近年来，尿液分析在临床疾病诊断和治疗中越来越受到重视，特别在肾脏疾病、泌尿系统疾病、感染性疾病、循环系统疾病、肝胆系统、内分泌等疾病进行预防诊断疗效观察及预后判断尤为重要。实验方法更应及早推广标准化，更好地为临床提供准确的参考数据。现介绍如下。

　　1  标准化的前提是尿标本的要求

　　1.1  留尿时间  住院病人尿常规最好留取清晨第一次尿，也可在7：00~8：00留取尿液作为第二次晨尿。门诊或急诊患者可随时留取，但在标本容器上必须注明留取时间。

　　1.2  容器  使用清洁一次性有盖尿标本容器，改变目前敞开无盖的尿杯。容器上应贴有病人姓名、验联号(或条码)及注明标本留取时间的标签。

　　1.3  送检时间  尿标本留取后(至少30 ml)，应及时送检，以免细菌繁殖及有形成分破坏。凡留尿超过2 h、未注明留尿时间及尿量不够的标本应拒收。检验科收到合格的尿标本后应签收，在送验单上注明收到时间，并应及时检查。

　　2  实验方法

　　2.1  干化学分析法

　　2.1.1  检测原理  尿蛋白检测原理：采用pH指示剂，蛋白质误差法，即在pH 3.2条件下，溴酚兰产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合发生颜色反应。红细胞检测原理：Hb类过氧化物酶法，Hb类过氧化物酶催化试剂块中的过氧化氢烯钴和色素原四甲替联苯胺或邻甲苯胺，后者脱氢氧化而呈色，红色深浅与血红蛋白和红细胞含量成正比。白细胞检测原理：白细胞酯酶法，白细胞试剂块中主要含有吲哚酚酯，重氮盐及其他物质，粒细胞中存在酯酶可作用于吲哚酚酯产生吲哚酚，再与重氮盐发生反应形成紫色缩合物，颜色深浅与白细胞含量成正比。亚硝酸盐检测原理：采用亚硝酸盐还原法，试剂膜块中的对氨基苯砷酸，N萘基乙二胺物质与尿中的细菌反应可将硝酸盐还原为亚硝酸盐并呈色，颜色深浅与亚硝酸盐含量成正比。

　　2.1.2  干化学分析存在的问题  许多因素干扰干化学特别引起假阴性，如尿液中含有大量维生素C，可使红细胞呈假阴性，大剂量应用青霉素干扰尿蛋白的检测，大量尿蛋白和胆红质及庆大霉素，先锋霉素的存在使白细胞的检测假阴性。干化学白细胞检测只对粒细胞敏感，而对淋巴细胞无反应，肾移植病人，发生排异反应尿液中，以淋巴细胞为主时，假阴性。尿蛋白检测对球蛋白敏感仅为白蛋白1%~2%，对本周蛋白不反应。葡萄糖膜块只对葡萄糖产生反应，对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应。酮体膜块对乙酰乙酸最敏感、丙酮次之，对β羟丁酸不反应。尿液在膀胱存留时间长或标本放置时间延长，导致白细胞破坏酯酶释放到尿液中，造成假阳性，而镜检阴性；肾病患者红细胞在肾脏或泌尿道破坏或尿比重过低，尿pH偏高均易造成红细胞破坏，血红蛋白释放到尿液中，造成假阳性，而镜检阴性［1］。标本要新鲜，变质尿液pH改变超过试剂缓冲能力，尿蛋白检测假阳性；标本久置，产生细菌亚硝酸盐检测假阳性，尿液污染，高浓度胆红素或使用呋喃妥因等药物时呈假阳性。

　　2.2  尿沉渣检查的标准化和自动化尿沉渣的检查内容  细胞成分：红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞等。上皮细胞包括：小圆上皮、扁平上皮、肾小管上皮细胞、移行上皮细胞、鳞状上皮细胞、多核巨细胞等。管型：透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、细菌管型、结晶管型、脂肪管型、混合管型、肾功能不全管型等。结晶：无定形结晶、磷酸盐结晶、草酸钙结晶、尿酸结晶等。细菌、寄生虫、酵母菌、精子、黏液丝以及临床医生的特殊要求。

　　2.2.1  普通离心法  尿液倒入玻璃试管，离心，弃去上清夜，将试管底部尿沉渣混均，倾倒在玻片上，低倍计数管型，以××个/Lp报告高倍计数红细胞，白细胞以××个/HP报告，缺点：主观判断，变动性大，结果误差大，无可比性，缺乏标准化。目前许多医院仍在应用，此方法应淘汰。

　　2.2.2  标准镜检法  10 ml尿液离心1 500 r/min 离心5 min，弃去上清液取0.2 ml沉渣混均后吸20 μl在尿沉渣计数板上计数红细胞，白细胞上皮细胞，细菌以××个/μl报告。但速度慢，辨认受主观因素影响，不适用于工作量大的医院不能在2 h内完成大量尿沉渣检测。

　　2.2.3  尿沉渣工作站  就是将UDS流式自动染色尿沉渣仪，射像显微镜，沉渣计数板，电脑组成一体。包括标准定量流动计数室，自动染色进样全程键盘控制，自动强制清洗，带盖尿杯水平离心机，图像电脑打印。但要强调标本最好晨尿，女性留后段尿，离心力，离心时间，沉渣留取量标准化。方法：尿液倒入专用刻度离心管10 ml离心，1 500 r/min 离心5 min弃取上清夜，将沉渣混均。将工作软件装在电脑上，打开尿沉渣工作站后，依次打开外设射像显微镜。新建标本号，输入病案号。姓名，年龄、姓名、性