白细胞计数标准操作程序

　　一.目的：规范白细胞计数标准操作

　　二.适用范围：适用于手工白细胞计数

　　三.支持性文件：全国临床检验操作规程第三版

　　四.原理:血液经稀酸稀释后，成熟红细胞全部被溶解，注入汁数池后，在显微镜下计数白细胞。

　　五.仪器:OLYMPUS显微镜、血球计数板

　　六.试剂:冰醋酸2ml，蒸馏水98ml， 10g／L亚甲蓝溶液3滴，混匀过滤后备用。

　　七.样本要求：静脉采血使用EDTA-K2抗凝。毛细血管采血应擦去第一滴血，以免混入组织液影响结果。标本采集完成放置5-10分钟后测定。

　　八.操作步骤：

　　1．小试管1支，加白细胞稀释液0．38ml。

　　2．用微量吸管准确吸取末梢血20?l，擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管中稀释液的底部，轻轻将血放出，并吸取上层清液，清洗吸管二次，混匀。

　　3．充池，静置2～3min，待白细胞下沉。

　　4．用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。

　　5.计 算

　　白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数*10*20*106/4 即4个大方格内白细胞总数*50*106=白细胞数/L

　　6.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。

　　九. 参考范围：

　　成人：  (4一10)X10*9／L

　　儿童：  (5一12)X10*9／L

　　新生儿：(15—20)X10*9／L

　　十.注意事项：

　　1.采血时不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。

　　2大小方格内压线细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。

　　3稀释液要过滤，小试管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。

　　4．一些贫血患者血液中有核红细胞增多，影响白细胞计数，应校正除去。

　　校正公式：  白细胞校正数＝X·100/100+Y

　　X＝未校正前白细胞数；

　　Y＝在分类计数时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。

　　5．计数时，两次重复计数误差不得超过10％。