革兰氏染色标准操作程序

　　1、目的

　　确保染色结果清晰可靠。

　　2、范围

　　球菌、杆菌和弧菌染色

　　3、职责

　　临床微生物实验室当班工作人员认真按程序文件操作。

　　4、SOP变动程序

　　本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员审核、批准和签字：专业主管、科主任。

　　5、试剂

　　5.1结晶紫溶液

　　A液：结晶紫2g

　　95%乙醇  20ml

　　Β液：草酸铵  0.8g

　　蒸馏水  80ml

　　使用前24小时将A液Β液混合后，过虑后装入试剂瓶内备用。

　　5.2碘液

　　碘  1g

　　碘化钾 2g

　　蒸馏水 300ml

　　5.3脱色液：95%乙醇

　　5.4复染液

　　储存液：沙黄2.5g

　　95%乙醇100ml

　　应用液：储存液 10ml

　　蒸馏水 90ml

　　6、工作程序

　　6.1待检标本用无菌生理盐水涂片，经自然干燥后用火焰固定。

　　6.2加结晶紫液染1分钟，清水冲去染液。

　　6.3加碘液染1分钟，清水冲去染液。

　　6.4加95%乙醇脱色液，不时摇动约10-30秒钟，至紫色已脱落为至，水冲洗。

　　6.5加复染液（伊红），染30秒钟，水冲洗。

　　6.6待涂片自然干燥后，油镜镜检。

　　7、质量控制

　　金黄色葡萄球菌为革兰氏染色阳性,大肠埃希菌为革兰氏染色阴性。

　　8、引用表格和文件