用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序

　　1.目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型

　　2.原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。

　　3.适用范围：配血、免疫性抗体检查、红细胞血型鉴定、特殊的研究

　　4.所需材料：聚凝胺试剂、定型血清、谱细胞、洁净试管、滴管、离心机

　　5.操作程序：（以交叉配血为例）

　　5.1以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。

　　5.2交叉配血试验：

　　主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。

　　次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。

　　阳对：2滴抗-D血清加1滴RH（+）3-5%的RBC悬液。

　　自身对照：2滴患者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。

　　5.3每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。

　　5.4分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。

　　5.5离心3400转/分15秒，弃上清，控干。

　　5.6观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。

　　5.7每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做记录。

　　5.8结果判定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。

　　6.注意事项：

　　6.1可以用EDTA血浆代替血清

　　6.2加入解聚液后应该在3分钟之内观察结果

　　6.3解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度。