HIV测定(胶体金法)标准操作规程

1、检验目的
      用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的HIV 1/2型抗体。
2、原理
      采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV 1/2型抗体。检测陽性样本时，样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组抗原则在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。
3、性能参数
? 用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病患者等各种类型的血清不得引起干扰。
? 本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不到准确的结果。
? 对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：

4、标本要求
? 标本类型：血清或血浆，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）无要求。
? 标本采集：见标本采集手册。
? 标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2～8℃保存，如果大于7天则须冷冻保存；全血标本建议在3天内检测，样品放在2～8℃保存，不得冻存。
? 标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。
5、容器和添加剂类型
      使用一般干燥管（不添加任何东西），或EDTA、柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。
6、贮存条件及有效期
      储存条件：4--30℃密封干燥处保存，有效期为16个月。

7、操作步骤
【血清、血浆样本】
（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。
（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。
（3）用微量加样器取60ul血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。
（4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。
【全血】
（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。
（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。
（3）用微量加样器取60ul全血样本，加到试剂卡的加样处，随即加一滴金标全血样本稀释液。
（4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。
【结果判定】
      阳性：测试条/卡在检测区（T）和对照区(C)位置各出现一条紫红色条带。如果检测区(T)的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。
      阴性：测试条/卡只在对照区(C)位置出现一条紫红色条带。
      失效：对照区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏或者是样本中抗体的含量过高。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并将待测样本稀释后用新的测试条/卡重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与试剂供应商联系。
【注意事项】
?   检测线颜色深浅的程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。测试区（T）内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象，但是，在规定的观察时间内，无论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带，也应判定为阳性结果。
?   本品检测陽性者，需进一步确证。
?   实验环境应保持一定的湿度，避风。避免在高温下进行实验。测试条从包装中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。
8、质量控制：
      阴性对照显示为阴性；阳性对照显示为阳性。
9、临床意义：
      监测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，用于帮助检测受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品检测阳性者，需进一步确证。
10、其它注意事项
?   必须按规定使用经中国药品生物制品检定所检定并贴有"检定合格"防伪标签的试剂。
?   试剂各组分在正当处理和保存的情况下直至效期都保持稳定，不能使用过效期的试剂盒。
                                                                                                                     编辑：范伟伟