政府叫停了基因测序用于临床诊断，那还有什么其它方法可以做无创产前诊断吗？尤其是针对21三体综合症（唐氏综合症）？
RainDance公司提出了一种新的，而且可能是更便捷、成本更低的解决方案：微滴数字PCR（Droplet Digital PCR, DD-PCR）。
检测原理：
RainDance公司出品的DD-PCR仪，一次可以产生1千万个微滴。
孕妇血液中的游离DNA，大概每毫升会有10~50ng,也就是说相当于1500~7500套全基因组DNA的碎片。如果取5毫升血，就相当于得到了7500~37500套全基因组DNA
针对21号染色体上的稳定、保守区段，设计20个或更多Taqman探针位点(VIC荧光)
针对其它染色体年的稳定、保守区段，也设计20个或更多的Taqman探针位点（FAM荧光）
把抽提的游离DNA进行DD-PCR，计算VIC/FAM的光点数比例
怀唐氏儿的孕妇血中的VIC/FAM比例，会比怀正常儿的孕妇血中的VIC/FAM多出2.5%或更多
优点：
成本更低，试剂+人工，100~200元就够了，远比高通量测序600~1000元/样本的试剂成本来得低
快，上午抽血、提DNA，下午做DD-PCR，下班前就可以知道结果了
操作简单，比起高通量测序所需的复杂操作，操作过程简单许多，可以轻松地在医院里完成实验，而无需把样本送到专业的第三方临检中心去
缺点：
依赖于特定位点，如果所测位点发生变异，则会影响结果的准确性
还未经过大样本的验证，可靠性还需经过实践的检验
背景资料：
RainDance 和 Bio-Rad DD-PCR
RainDance 和 Bio-Rad 都推出了微滴数字 PCR (droplet digital PCR, ddPCR)。
其原理相似，都是：
制备荧光PCR反应液体，这步与常规的Q-PCR相同
通过特制的微滴发生装置产生可以稳定存在的荧光PCR微液滴
PCR反应
通过类似流式细胞仪的技术，把微滴挨个通过毛细管，激光扫描检测每个通过的微滴，看有没有特定波长的荧光被测到
通过计算有荧光的微滴数，再通过泊松分布原理，反推出原来样本中目标序列的拷贝数是多少
微滴数字PCR的技术难点：
找到一种表面活性剂，即可以让微液滴的表面张力大幅下降，以保持微液各自稳定存在，不相互合并，而且要扛得住PCR过程的温度反复升降
同时这种活性剂又不会太大幅地改变PCR酶各种性能：聚合活力、对起始序列的判读能力、合成过程中的保真能力、Taq酶的外5'→3'的外切酶活性
RainDance和Bio-Rad都分别找到了自己的表面活性剂，来让微滴稳定地存在
RainDance 和 Bio-Rad 两家的 ddPCR 比较：
RainDance 可以产生1,000,000个微滴；而 Bio-Rad 可以产生20,000个微滴。所以RainDance的检测线性范围更大
RainDance 的仪器比 Bio-Rad 更贵
编辑：范伟伟
