病理检测是肿瘤诊断的金标准,但是要想取得病理检测的样本,开刀或者穿刺还是很难避免。如果能有一种更小创伤的取样方式,比如抽血检验就可以做“循环肿瘤细胞”(CTC, Circulating Tumor Cell)的病理诊断,一定会让许多病人更加受益。
在血液里提取、富集CTC细胞的难点在于,CTC细胞与白细胞的比例大约是1:107。
强生公司开发了一种富集CTC细胞的系统:CellSearch System,来富集CTC。
CellSearch系统的工作原理:
1. 富集原理:
肿瘤细胞大多数来源于上皮细胞,所以会带有上皮细胞特有的表面抗原EpCAM,CellSearch用带抗EpCAM的磁珠来富集上皮细胞。
2. 显色原理:
a. CD45抗原是白细胞特有抗原,用带荧光的抗CD45的抗体来标记白细胞
b. Cytokeratin 8/Cytokeratin18/Cytokeratin 19都是CTC细胞特有的表面抗原,用带荧光的抗Cytokeratin的抗体来标记CTC
c. DAPI是DNA染料,用来对细胞核进行染色
d. 用针对目标蛋白的抗体(如抗HER-2、EGFR、MUCI的抗体),来看CTC细胞中特定抗原是否表达、表达量
3. 检测
a. 通过磁力作用,把磁珠连同吸附的CTC富集到检测盒的表面
b. 拍照成像,先自动分的,再人工观察,得出诊断结论
CellSearch的特点:
1. 把CTC细胞与白细胞的比例从原来的1:107级别富集到1:103级别
2. 全自动化操作
3. 可以看到目标抗原(HER-2、EGFR等)在CTC细胞中是否表达、表达量的多少
4. 富集到的CTC细胞是死的,无法回收后进行下一步的培养
5. 要抽7.5mL病人的血,检测的灵敏度基于CTC细胞在血液中的数量。对于乳腺癌等产生较多CTC细胞的癌症的效果较好。而对于产生较少CTC细胞的癌症种类,则不够灵敏。
编辑:范伟伟