上海市儿童医院上海交通大学附属儿童医院 高原，杨剑敏，王欢，马展，张泓
摘要：目的 调查分析本实验室健康儿童末梢血血常规参数的参考区间。方法 对体检合格的２４０８名２～６岁儿童进行年龄分组（２、３、４、５），并做末梢血血常规分析，检测白细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均血红蛋白浓度等参数，不同年龄组之间各项参数做统计学分析，得出各项参数的参考区间。结果 不同年龄组之间均数比较，白细胞参数差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），但各组均数与总体区间均数间相差＜２５％，不建议分组，其他各项参数差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），上述各项参数合并后白细胞为４．８～１１．６（７．７）×１０９／Ｌ，红细胞为３．７５～５．１８（４．４７）×１０１２／Ｌ、血红蛋白为１１０～１４５（１２６）ｇ／Ｌ、红细胞压积为３１．２～４１．５（３６．３）％、红细胞平均体积为７６～８８（８１）ｆｌ、红细胞平均血红蛋白含量为２５～３１（２８）ｐｇ和红细胞平均血红蛋白浓度为３２９～３６８（３４９）ｇ／Ｌ、血小板为１７５～４６０（３１０）×１０９／Ｌ。血红蛋白、红细胞、红细胞压积等参考区间与长沙儿童末梢血作比较基本一致，但低于昆明儿童末梢血，血小板参考区间的上限和下限均高于长沙、昆明。结论 不同地区、不同实验室应建立各自检测系统的参考区间。
关键词：参考区间；血常规；末梢血；儿童
血常规检测在临床上是使用最多的实验室检测指标之一，而末梢血血常规检测在儿童专科医院中是使用最广泛的，但是末梢血血常规各项参数的正常参考范围时常是引用文献或由厂家试剂盒说明书提供，显然欠妥，因为这些参考值来自不同国家、不同地区、不同人群，因此应用前需加以验证，有条件的临床实验室应根据自身不同检测系统建立各自人群特征的参考区间。由于儿童是一个特殊群体，因此，建立儿童年龄相关的末梢血血常规参考区间显得尤为重要，我们对上海２４０８名体检健康儿童末梢血血常规进行了调查分析，初步建立了本实验室末梢血的参考区间。
材料和方法
一、调查对象
在上海市儿童保健所进行体检的１２家幼儿园，年龄范围２～６岁，体检要求生长发育正常，腋下体温≤３７．５℃，要求无贫血史，２周内无发热服药史，经统计共２４０８例，按性别组分类，其中男１３０８名，女１１００名。按年龄分组，２～３岁为第一组，共７３１名，３～４岁为第二组，共５５６名，４～５岁为第三组，共６３５名，５～６岁为第四组，共４８６名。
二、调查时间
２０１０年８月１日至２０１０年８月３０日。
三、仪器
Ｓｙｓｍｅｘ-８００ｉ全自动血液分析仪２台，代号分别为Ａ和Ｂ。
四、校准和质控
每年由厂商工程师对上述２台血液分析仪校准１次，每年上半年和下半年对仪器作精密度测试各１次，要求变异系数在规定范围内。每天开机用２个浓度水平ｅＣＨＥＣＫ质控品对血液分析仪进行在线质控。校准品和质控品均由Ｓｙｓｍｅｘ公司提供，校准品批号为９１８１０５２５。仪器Ａ和仪器Ｂ每月进行３次新鲜全血比对试验，偏倚数据属于允许范围之内。
五、检测参数
包括白细胞计数（ＷＢＣ）、红细胞计数（ＲＢＣ）、血红蛋白浓度（ＨＧＢ）、红细胞压积（ＨＣＴ）、红细胞平均血红蛋白含量（ＭＣＨ）、红细胞平均血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）、红细胞平均体积（ＭＣＶ）、血小板（ＰＬＴ）计数。
六、方法
由熟练的检验人员对儿童无名手指用７５％酒精彻底消毒，待干，用一次性ＢＤ采血器进针，要求血滴能迅速、自然流出，并弃去第一滴血，然后用微量吸管采集儿童手指血标本３０μＬ，加入到含５％乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ-Ｋ２）抗凝剂的塑料尖底管中，充分混匀，标本保存在１５～２５°Ｃ，２ｈ内完成检测，并记录结果。
七、统计学方法
使用ＳＰＳＳ１３．０统计软件进行统计学分析，所检测的各项血细胞参数在被调查人群中呈偏态分布，取对数后呈正态分布，得出均值和９５％置信区间（即ＣＩ，参考范围），多组间均数比较采用单因素方差分析，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
结 果
２４０８例不同年龄组末梢血血常规各项参数检测结果见表１。不同年龄组各项参数做方差分析，经统计，ＷＢＣ多组间均数比较差异有统计学意义（Ｆ＝１６．３，Ｐ＜０．０５），Ｓｉｎｔｏｎ等建议各组均数与总体区间均数间差异＜２５％，不建议分组。ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、ＰＬＴ等参数组间均值经统计差异无统计学意义（Ｆ分别为２．３１、１．３６、２．１４、１．９８、１．８５、１．９５、２．１６，Ｐ均＞０．０５），所以上述各项参数可以合并统计，结果见表２。
以２４０８例正常儿童血常规各项参数值做散点图，参考值为纵坐标，年龄为横坐标，观察根据年龄递增各参数的数据分布趋势，ＷＢＣ参数随着年龄增长参考区间范围逐渐缩小且呈下降趋势（见图１），其余参数变化不大。
本次调查血常规各项参数与长沙市、昆明市２～６岁健康儿童手指末梢血血常规参考区间作比较，见表３。
讨 论
血常规检测在儿童专科医院中是使用最广泛的检测指标之一，而手指末梢血因有取血量少、疼痛少、创伤小、易操作，更易为婴幼儿患者及其家属接受。由于自动化的血液分析仪有各自检测原理和检测系统，末梢血和静脉血的采血部位的不同，都会造成参考区间之间存在一定的差异。因此，国际临床化学与检验医学联合会（ＩＦＣＣ）建议每个有条件临床实验室应根据不同检测系统建立各自人群特征的参考区间。
本次调查采用了２４０８个２～６岁的健康学龄前儿童作为参考样本，在儿童中具有一定的代表性。不同年龄组之间ＷＢＣ均数比较，虽然经统计差异有统计学意义，Ｓｉｎｔｏｎ等建议各组均数与总体区间均数间差异＜２５％，不建议分组，在实际临床中使用一般也不建议过多的分组，避免给临床诊断带来不必要的干扰。合并后的ＷＢＣ参考区间与长沙、昆明二地的健康儿童末梢血作比较基本一致，但与《全国临床检验操作规程》（第三版）儿童组比较，有明显差异，操作规程上的ＷＢＣ参考区间为（８～１０）×１０９／Ｌ，下限明显高于本次调查的４．８×１０９／Ｌ。在ＷＢＣ散点图上观察到参考区间随着年龄增加，参考区间的变化范围逐渐缩小，这与国外学者ＬｉｏｒｅｎｃＱｕｉｎｔｏ等报道相一致，与儿童生长发育速度随着年龄增加逐渐减缓，个体之间的差异逐渐减少有关。不同年龄组ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、ＰＬＴ等检测结果的参考区间经统计组间差异无统计学意义，可以合并统计使用，合并后的ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ等参数与长沙地区健康儿童末梢血作比较基本一致，但与昆明地区儿童末梢血比较有明显差异，明显低于他们的调查结果，这与昆明地区的高海拔有关，因为海拔越高，大气压越低，肺泡氧压也越低，ＨＧＢ、ＲＢＣ、ＨＣＴ等也越高。ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ３项参数上海和长沙、昆明三者比较基本一致。ＰＬＴ参考区间与邵俊彦等对１８０例年龄３月至１２月健康婴儿用ＳｙｓｍｅｘＸＳ-８００ｉ血液分析仪进行末梢血血常规检测所得ＰＬＴ参考区间大致相似，但与长沙、昆明等儿童末梢血比较有一定的差异，与成人静脉血的ＰＬＴ（１１０～３２０）×１０９／Ｌ相比明显偏高，引起偏高的原因与手指采血途径有关，挤压手指容易造成组织液混入和细胞碎片的产生，易对血液分析仪计数产生假性偏高，由于目前儿童血常规检测仍然以末梢血为主，考虑采纳该ＰＬＴ参考范围需要在标本种类中注明末梢手指血，同时与临床医生进行沟通并达成一致。通过这次调查分析旨在对本实验室的检测系统和方法学途径做初步研究，建立自己的参考区间。在这次调查中包括了参考样本的选择，样本的采集的技术要求，分析方法的准确性、精密度和质量控制，数据统计和参考区间的计算等方面。参考区间的研究，会随着我们认识上的提高、分析方法的不断改进，还会对儿童血常规末梢血的参考区间作不断的修正和更新。
在这次调查中，缺少２岁以下婴幼儿的资料，由于组织较大规模的婴幼儿体检比较困难，大样本数据难以获得，将来可以通过妇幼保健院的多中心合作进行数据收集整理而获得。
编辑：范伟伟
