辽宁省职业病防治院理化检验科 宋兴海 张玉川
液相色谱是以液体作为流动相的色谱分析方法。高效液相色谱仪在医药、生化方面的应用主要有：分析体液内异常代谢物质，分析药物的组分含量，药物生产中进行中间控制，分析药物在体内的残留量，测定药物在各器官中的代谢产物，定性测定细胞核中的甙及甙酸，分析核酸以及分析氨基酸、酶、糖等。
高效液相色谱仪的结构主要有：输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统及控制系统等部分。其中由瑞士康强公司(KONTRON INSTRUMENTS)生产的KONTRON HPLC康强高效液相色谱仪400型主要有以下几部分组成的。
422 pump muster全电脑控制的422主泵，它是单泵双活塞系统，全电脑控制。
422 pump slave全电脑控制的422付泵，它也是单泵双活塞系统，全电脑控制。
465 Autosarnple全电脑自动进样器，它可自动进行样品针清洗，柱前样品衍生等工作。
430 Detector UV/VIS全电脑控制检测器，检测器可根据您工作的需要灵活选择，同时可选不同的流动池。
SFM25荧光检测仪，可用于HPLC检测，也可用于比色杯检测。
OVEN 480温度控制器，可以全电脑自动设置温度。
450MT色谱工作站，它是由486电脑所组成的，它可遥控所有KONTRON 400、300系列各种仪器，界面极其友好，前后台工作可以感到得心应手，486电脑配置了积分软件，全自动的最佳化积分。
下图是KONTRON EIPLC康强高效液相色谱仪的结构框图：
工作时贮液器中作为流动相的液体(也叫洗脱液)须先进行充分的脱气，以防止在系统中产生气泡，影响仪器的灵敏度。脱气后的液体由梯度装置控制，按需要的比例混合，在高压泵的作用下进入色谱分离柱。当液态样品由进样器注入后，即可被来自高压输液泵的高压洗脱液(流动相)带入装填了固定相的色谱柱，并在其内的两相中进行反复多次的分配等过程，直至各组分离开后，随洗脱液依次流过检测器的流动样品池，进行检测、记录。
KONTRON HPLC出现过这种故障。
(一)故障现象：
450MT色谱工作站无法控制422 Pumps双泵、465 Autosample自动进样器、430 Detector检测器、DVE N 480温度控制器。
(二)故障原因：
色谱工作站损坏，Multiport串行接口连接器出现故障，Data system 450系统软件中串行口设置不正确。
(三)检修步骤：
1．首先，检查串行口之间的连接电缆线是否接触良好，有无断头现象。
2．对422 pumps双泵．Detector 430检测器，SFM 25荧光光度计，OVE N 480温度控制器，465 Autosample自动进行器等所有设备进行自检，自检结束，一切工作正常。
3．然后，再检查450MT色谱工作站，它是由486电脑组成的，在系统中装入了DATA SYSTEM450积分软件，检查发现486电脑的主板损坏，需重新检修色谱工作站。
4．更换486电脑主板，安装A/D转换器卡，重新进行系统设置，更换Mouse接口在COM2上，连接控制接口在COM1上。
5．安装Data system 450积分软件系统，xcopy A：＼D450 C：＼D450＼／s
6．进人Data System 450系统运行INST450，C：＼D450>INST450出现Data System 450 Installation V3.90的界面。
7．选择第1项Install Periphelral Device(RS-232)出现Installation Module Ser Device Selection的界面
8．定义色谱工作站所控制的设备DETECT430、AUTOSAMPLE 465、OVEN 480、SFM 25，设置各个设备的串行接口在Muhiport上的位置。
9．返回主画面，选择第6项，Pumps Commrmication&Others，出现installmion moudle Altemute selection的界面
10．选择第1项，出现Installation Module Pum p Selection的界面，安装P422m、P422s双泵，设置Muhiport串行接口的位置。
11．返回KONTRON Installation Module Alternate Sdection主画面，选择第3项，setup Communication Ports。
出现Installation rnodule serial Communication的界面，设置串行口的波特率、奇偶校验位、停止位、数据位等。
12．再返回主画面，选择第9项store return to MSDOS的界面，进行存盘返回。
13．运行D450积分软件系统，运行(RUN)系统，计算机(色谱工作站)能控制所有设备，一切工作正常。
总之，HPLC高效液相色谱仪是一种比较复杂的生化仪器，在维修过程中，要求维修者必须具备计算机的硬件、软件知识，掌握高效液相色谱仪的电原理和各部分的作用，了解微处理器在色谱仪中的作用，只有这样，遇到问题才能迎刃而解。
编辑：范伟伟
