浙江舟山市妇幼保健院检验科 陈萍,洪开听,夏邦世,周文军,沈忠海
细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是妇科常见疾病之一,发病率达10%~50%[1-2]。本研究应用珠海银科生物技术研究所生产的BV快速检测试剂盒检测BV病原菌代谢产物多胺,其结果与Amsel 标准进行比较。
一、材料和方法
1.检测对象 随机选取舟山市妇幼保健院妇科门诊疑似BV患者365例,年龄18~55岁,平均33.2岁。
2.方法 (1)采样:所有对象采样前48 h内避免性生活、阴道冲洗等,用无菌棉拭子采集患者阴道壁下1/3处或后穹窿处分泌物,同时采集3份,1份用于分泌物常规检查及Amsel 标准诊断,1份用于多胺快速检测,另1份用于淋病奈瑟菌及支原体培养;(2)多胺快速检测:将标本棉签放入无菌小试管内,滴加5~10滴BV提取液,充分洗脱,取此液3~5滴加入检测板一端的加样窗内,使标本充分吸入后滴加BV反应液2~3滴,并用试剂盒内的检测笔在观察窗的薄膜上任意划一线,室温反应2 min,观察划线颜色,变蓝紫色为阳性,无颜色变化或变为黄绿色为阴性。
3.Amsel 诊断标准 (1)阴道分泌物增多、变稀、有异味;(2)pH值>4.5;(3)胺试验阳性;(4)线索细胞阳性。以上4条符合3条即为Amsel 诊断阳性。该项操作由经验丰富的技师完成。
4.统计学方法 多胺快速检测结果与Amsel 诊断结果的比较采用Kappa一致性检验,并参照夏邦世等[3]Kappa值的评判标准判断二者的一致性强度。
二、结果
1.多胺检测法与Amsel 法BV阳性检出率比较 365例患者中,多胺检测BV阳性118例,其中99例与Amsel 标准诊断相符合,19例Amsel 标准诊断阴性;Amsel 标准诊断BV阳性107例,其中8例多胺检测阴性。二者比较符合率92.6%[(99+239)/365],Kappa=0.827(P<0.05)。以Amsel 为金标准,多胺快速检测法诊断BV的敏感性92.5%(99/107),特异性92.6%(239/258),阳性预测值83.9%(99/118),阴性预测值96.8%(239/247)。见表1。
2.其他病原体感染时BV检测情况 (1)31例阴道毛滴虫感染者中10例多胺检测结果阳性,其中8例Amsel 标准诊断阳性,2例阴性,二者符合率93.5%;(2)47例阴道念珠菌感染患者中16例多胺检测法与Amsel 法所得阳性结果一致,3例前者阳性后者阴性,l例前者阴性后者阳性,二者符合率91.5%;(3)16例淋病余瑟菌感染者中5例多胺检测阳性,并与Amsel 标准诊断结果符合,1例前者阳性后者阴性,二者符合率93.8%;(4)80例支原体培养阳性患者中43例多胺检测法与Amsel 标准诊断所得阳性结果一致,4例前者阳性后者阴性,2例前者阴性后者阳性,二者符合率92.5%。
三、讨论
以往认为BV的主要病原菌是阴道加德纳菌(GV),Amsel 标准诊断以及以往报道的革兰染色法、脯氨酸氨基肽酶检测法等[4]的检测原理主要也是针对GV的。近年研究认为,除了GV感染外,BV尚可因定植于阴道内的厌氧菌过度繁殖和/或支原体、阴道毛滴虫、阴道念珠菌等感染导致菌群失调而引起。对于多种微生物混合感染的BV来说,单一检测某一种细菌或其代谢产物。其局限性是难以避免的。
GV在代谢过程中可产生胺类物质,支原体和某些厌氧菌等微生物也可因分解尿素或蛋白质而产生氨。多胺检测法就是基于经典的胺试验设计而成。BV患者阴道分泌物中的胺类,经提取液抽提,加KOH溶液反应,产物在检测板复式膜上经放大后,可显示颜色变化。365例患者中多胺检测法得到阳性结果118例,Amsel 标准诊断得到阳性结果107例,二法符合率92.6%,而多胺测试一定程度上提高了BV的阳性检出率。目前尚无新的统一的BV诊断标准,不能确切排除多胺检测法的假阳性可能,但患者的临床资料显示,多胺检测法阳性而Arnsel 标准诊断阴性的11例均有不同程度的阴道炎临床症状。分析原因,可能与多胺检测法扩大了BV病原体检测范围有关。另外,发现合并有阴道毛滴虫、阴道念珠菌、淋病奈瑟菌和支原体感染时,多胺检测也有助于BV的辅助诊断,与Amsel 标准诊断结果比较,符合率≥90%。
参考文献
[1] Mcgregor JA,French JI.Bacterial vaginosis in pregnancy[J].Obstet Gynecol Surv,2000,55(5 suppl 1):S1—S19.
[2] 刘凤玲,吕苏成,刘求真.阴道加德纳菌在细菌性阴道病患者及正常女性生殖道中的分布[J].第一军医大学分校学报,2001,24(2):89-90.
[3] 夏邦世,吴金华.Kappa一致性检验在检验医学研究中的应用[J].中华检验医学杂志,2006,29(1):83-84.
[4] 唐振华,陆庭嫣,潘卫民,等.快速脯氨酸氨基肽酶检测在细菌性阴道病诊断中的应用价值[J].上海医学检验杂志,2003,18(5):297-298.
编辑:范伟伟