华中科技大学同济医学院附属荆州医院检验医学部 鄢斌
【摘要】目的 探讨在贝克曼LX20 生化分析仪上能否使用开放试剂。方法 按EP9-A 文件的要求,以1 台LX20 仪器配置封闭试剂系统为参考系统,以另外1 台LX20 仪器配置开放试剂系统为比对系统,选择40 份不同浓度水平的新鲜患者血清,在不同试剂系统间同时测定总胆红素( TBIL) 、丙氨酸氨基转移酶(ALT) 、天门冬酸氨基转移酶(AST) 等9 个生化项目,计算相关系数和回归方程,并以每个项目的医学决定水平浓度进行偏倚估计。结果 9 个生化项目开放试剂与原装试剂方法学比较,除TBIL 在不同系统间的结果不能被接受外,其余项目均可被接受。结论 在经过严格的方法学比对实验后,贝克曼LX20 生化分析仪可以使用开放试剂替代大部分的封闭试剂。
【关键词】贝克曼LX20 生化仪; 试剂; 偏倚评估
贝克曼LX20 生化分析仪(下称LX20) 封闭通道的试剂是针对该机型而设计的,省去了调试参数等环节,结果准确、稳定,具有良好的溯源性,得到广大用户的认可,但其试剂昂贵。为了降低检验成本,笔者尝试使用开放试剂,按照美国临床实验室标准化委员会EP9-A (用患者样本进行方法对比及偏差评估) 文件[1 ] 要求,并参照CLIA′88 的允许误差标准[2 ] ,对本室2 台LX20 不同试剂系统间进行比对实验,探讨LX20 使用开放试剂的可行性。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 仪器与试剂 2 台贝克曼LX20 ,分别称为LX20A 和LX20B , LX20A 使用贝克曼原装封闭试剂及校准品;LX20B使用开放试剂,由上海东方顺宇公司提供试剂及校准品。
1. 1. 2 标本 采集不同浓度的患者新鲜血清40 份。
1. 2 方法
比对实验前由贝克曼公司工程师对LX20A 仪器进行校准,在校准通过并可溯源后,以LX20A 为参考仪器系统,LX20B 为比对仪器系统,40 份不同浓度水平的新鲜患者血清在不同检测系统间同时进行9 个生化项目的双份测定,包括总胆红素( TBIL) 、丙氨酸氨基转移酶(ALT) 、天门冬酸氨基转移酶(AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 、L-γ-谷氨酰转移酶( GGT) 、淀粉酶(AMY) 、尿素(UREA) 、肌酐(Cr) 、葡萄糖( GLU) 。每天测定8 份,5 d 内检测完毕。测定前先对标本排序,按照顺序由1～8 测定第1 次,再按照顺序由8～1 测定第2 次,收集实验数据,记录实验结果,剔除离群值。以参考仪器系统为X ,以比对仪器系统为Y ,分别进行直线回归分析( Y = a X + b) 。将各个项目给定的医学决定水平浓度(Xc) 分别代入各自相应的回归方程得相应的Y值,计算相对偏倚度B % = ∣ Y - Xc ∣/ Xc ×100 % ,要求每个值的相对偏倚度必须不超过1/ 2CLIA′88总的允许误差。
2 结果
2. 1 开放试剂与封闭试剂检测系统9 项生化结果的相关分析见表1 。各检测系统间的相关系数( r2 ) 均大于0. 950 ,说明回归统计的斜率和截距可靠,可以用它们去估计不同检测系统间的系统误差。
2. 2 开放试剂检测系统的可接受性评价见表2 。由表2 可知,开放试剂检测系统除TBIL 项目比对结果不能被接受外,其余生化项目均可被接受。
3 讨论
封闭试剂检测系统针对开放试剂检测系统来讲,优势是很明显的,它的准确性和溯源性相对能得到保障。国际上通常每一份检验报告的法律责任是由其使用设备的制造商负责而不是医院。在美国,实验室必须按CLIA′88 的文件规定,严格按照厂商要求使用相应的配套试剂及校准品,并且对各项目检测系统按厂家提供的分析性能进行确认后,方可对患者标本进行检测,因此使用封闭系统就不难理解了。但是,由于国内的情况与国外的差别,主要是经济上的因素,多采用开放系统。如何实现检测结果的溯源性及可比性是一个极大的问题。
本研究通过对贝克曼LX20 使用封闭试剂和开放试剂两套检测系统进行比较, 结果显示开放试剂检测系统ALT、AST、ALP、GGT、AMY、UREA、Cr 、GLU 等项目在医学决定水平处的相对偏倚未超过1/ 2CLIA′88 总的允许误差,故认为与封闭试剂检测系统有可比性,其检测结果可被接受。TBIL项目比对实验结果却表明其在医学决定水平处的相对偏倚均超过1/ 2CLIA′88 总的允许误差,不能被接受。究其原因可能是原装TBIL 试剂的方法学为重氮法,而开放试剂使用的是国产公司的试剂,方法学为氧化法,二者使用不同厂家生产的试剂,且检测原理不同,从而使测定结果可能存在不一致。加之封闭试剂的校准品只是针对本公司仪器而定的,开放试剂的校准品却几乎是所有仪器公用的,很少有专门针对不同仪器而赋不同值的,难免不会对检测结果产生影响,所以实验室生化仪要慎用选择开放试剂检测系统。但这并不表示完全不能使用开放试剂。实验证明大多数的开放试剂还是具有可比性的。问题的关键是,实验室必须经过严格的方法学比对实验后,生化仪器才可以使用开放试剂替代部分封闭试剂。
关于不同检测系统的判定尺度国内没有统一标准,本文参照CLIA′88 的允许误差标准。对于超过1/ 2 总的允许误差的开放试剂检测系统,应仔细分析原因,确认是否为方法学问题,或是仪器本身固有的系统误差造成的。若要选择此项目的开放试剂系统,可运用比对封闭试剂系统的线性回归方程,利用回归方程中的斜率和截距校正开放试剂系统,这样才能使其具有可比性。
参考文献
[ 1 ] 申子瑜,李萍. 临床实验室管理学[M] . 2 版. 北京:人民卫生出版社,2007.
[ 2 ] 王治国. 临床检验质量控制技术[M] . 北京:人民卫生出版社,2004.
编辑：范伟伟
