河南省南阳市中心医院检验科 施保华
[摘要] 目的 探讨阴道炎五联检测的临床应用。方法 选择2010年1月～2010年9月在门诊就诊的阴道炎患者200例，进行阴道炎五联检测，同时用显微镜镜检，并接种至念珠菌显色培养基和滴虫培养基培养，观察五联检测法与标准诊断符号情况。结果 乳酸杆菌诊断符合率为94.44%，白细胞诊断符合率为92.5%，BV诊断符合率为95.76%，滴虫诊断符合率为97.56%，念珠菌诊断符合率为91.66%。结论 五联检试剂盒对阴道炎临床诊断有着积极的指导意义，具有清晰、简便、快速、简便等特点。
[关键词] 阴道炎；五联检测；临床应用
阴道炎指阴道黏膜及黏膜下结缔组织的炎症，是妇科的常见疾病和多发病[1]。临床上有10%～25%的妇女患过此病，其中30%～65%有性交传染疾病。主要特征是阴道分泌物增多，伴有外阴瘙痒等临床表现。阴道炎一般由细菌、真菌、滴虫[2]引起，其中细菌性阴道炎占首位，为了能够有效提高对阴道炎的诊断，我们采用阴道炎五联检试剂盒检测取得良好的临床效果，现总结报告如下。
1 临床资料与方法
1.1 一般资料 选择我院2010年1月～2010年9月在我院门诊就诊的阴道炎患者200例，进行检测，所有被检查者要求就诊前3d无性生活、禁用阴道霜剂(或膏剂)药物或阴道灌洗。
1.2 标本的采集 用一次性医用棉签采集阴道壁下1/3的阴道分泌物，停5S后将棉拭子旋转一周采集分泌物，尽可能多取标本量，采集后尽快送检。用采集阴道分泌物的拭子直接涂抹在pH试纸上，记录pH值，在加样试管中滴加专用稀释液6～8滴，充分涮洗后用手指轻轻挤压试管壁，使拭子吸附的液体流回试管，制成阴道处理液。
1.3 试剂及检测内容 试剂为郑州安图绿科生物工程有限公司提供的五联检测法检测试剂盒。检测内容包括：pH值、过氧化氢(H2O2)、白细胞酯酶(LE)、生唾液酸苷酶(NA)和脯氨酸氨基肽酶(PIP)。以进行乳酸杆菌、白细胞(清洁度)、细菌性阴道病(BV)、念珠菌以及滴虫诊断。
1.4 检测方法 用一次性塑料吸管将稀释的阴道分泌物液分别滴1滴到检测板反应孔中，再在唾液酸反应孔中加1滴唾液酸酶显色液，将反应板置于37℃恒温干容器15min后观察和记录结果：过氧化氢浓度为阴道乳酸杆菌的标志物，不显色或淡黄色，为异常，提示阴道菌群失调，阴道环境病态或处于亚健康状态；显红色或紫红色为正常。白细胞酯酶：显蓝色为异常，呈色深度与白细胞酯酶呈正比，不显色为正常；生唾液酸苷酶：为阴道加德纳菌、嗜血杆菌等BV致病菌的标志物，显红色或紫红色为异常，不显色或显浅淡色为正常。脯氨酸氨基肽酶：由阴道加德纳菌和动弯杆菌产生，是BV相关病原体所分泌的特异性标志酶，显黄色为异常，不显色或显浅淡色为正常。
1.5 观察内容 五联检测法检测同时用显微镜镜检，并接种至念珠菌显色培养基和滴虫培养基培养；BV以显微镜镜检发现线索细胞>20%/HP为标准，乳酸杆菌和白细胞以显微镜镜检结果为标准，念珠菌和滴虫分别以念珠菌显色培养基和滴虫培养基培养结果为标准[3]。观察五联检测法检测与标准诊断符号情况。
2 结果
2.1 乳酸杆菌检测结果 五联检试剂盒过氧化氢指示乳酸杆菌阳性102例，显微镜镜检结果阳性108例，诊断符合率为94.44%。
2.2 白细胞检测结果 五联检试剂盒通过白细胞酯酶检测白细胞阳性185例，显微镜镜检结果阳性200例，诊断符合率为92.5%。
2.3 BV检测结果 五联检试剂盒通过唾液酸苷酶和脯氨酸氨肽酶检测BV阳性181例，显微镜镜检结果阳性189例，诊断符合率为95.76%。
2.4 滴虫及念珠菌检测结果 五联检试剂盒通过氨基葡萄糖酶和pH检测滴虫阳性120例，滴虫培养基培养结果阳性123例，诊断符合率为97.56%。五联检试剂盒通过氨基葡萄糖酶和pH检测念珠菌阳性121例，念珠菌显色培养基培养结果阳性132例，诊断符合率为91.66%。
3 讨论
阴道分泌物显微镜镜检是检测阴道炎最常用的方法，但有经验要求高、主观性强等缺点，灵敏度和特异性方面也存在严重问题；阴道分泌物培养是对念珠菌和滴虫诊断的主要方法，但需要时间长，不能大范围检测，应用受到限制。
过氧化氢是阴道乳酸杆菌产生的一种重要杀菌物质[4]，对防止致病菌的定居、增殖，维持阴道微环境起重要作用，其浓度与乳酸杆菌数量成正比；白细胞酯酶是阴道宿主细胞反应酶标志物，存在于粒细胞的胞浆内，只有当粒细胞被细菌产生的毒素分解后才能释放出来；唾液酸酶是BV时出现的一些微生物如加德纳菌、普雷沃菌、厌氧菌、游动弯曲杆菌合成的一种胞外酶[5]，可增加细菌对宿主黏膜及组织表面的附着力，其活性与这些细菌的数量成正比；其活性与病原菌数量成正相关，检测唾液酸苷酶活性可了解病原体定居和繁殖的情况。脯氨酸氨肽酶可由多种细菌和真菌产生[6],其中与脯氨酸氨肽酶相关细菌在阴道环境中包括加德纳菌和动弯杆菌，是BV相关病原体所分泌的特异性标志物。
通过五联检试剂盒结果与显微镜镜检、培养结果比较，五联检测法符合率较高，对临床诊断有着积极的指导意义[7]。传统方法受检验人员的主观因素和经验影响较大，而五联检试剂盒的每一检测指标均以加入足量酶的底物后出现不同颜色而进行诊断，结果清晰、简便。与传统方法相比，更快速、简便，尤其适用于临床实验室快速检测[8]。
参考文献
[1] 宋千钧.微波治疗阴道炎症疗效观察[J].当代医学,2008(18):68.
[2] 田根富，俞夏美．细菌性阴道病四项检测指标观察[J]．检验医学，2008，23(3):317-318.
[3] 李连青，朱庆义，刘俊芬，等．阴道加德纳菌对细菌性阴道病的病原学诊断评价[J]．中华医院感染学杂志，2005，15(2):226-230.
[4] 玉楠．细菌性阴道病及其诊断[J]．中华检验医学杂志，2000，25(5)：303-304．
[5] 唐振华，陆庭嫣，潘卫民．等．唾液酸酶检测在细菌性阴道病诊断中的应用价值[J]．上海医学检验杂志，2003，18(5):297-298.
[6] 刘俊梅，杨文东，杨进国．快速脯氨酸氨基肽酶与唾液酸酶检测在细菌性阴道病诊断中对比研究[J]．中国妇产科临床杂志，2006，7(1):4546.
[7] 玉楠．细菌性阴道病及其诊断[J]．中华检验医学杂志，2000，25(5):303-304.
[8] 缪丽韶，梁艮英，杨玉兴.4项检测指标诊断细菌性阴道病的价值比较[J],检验医学与临床，2010，7（13）:13.
编辑：范伟伟
