摘要：当前，环境卫生、食品安全的要求越来越高。各类微生物检测机构，面临越来越频繁的菌落总数统计和结果报告。传统的菌落计数，不仅极其耗费人力和时间，而且采用肉眼观测计数极大的影响准确性，已成为当前微生物定量检测的极大瓶颈。“迅数自动菌落计数仪/菌落分析仪”，以其强大的功能和优良的性能（1 小时轻松处理 400 个平板的菌落计数和分析报告），大大节省时间、提高准确度、实现数字化管理，开创微生物菌落检测的数字化时代。
一 全自动菌落计数/分析仪替代传统手动计数，激发微生物快检全新创新应用
结合常规微生物培养基，只需操作 PC，一台仪器即可实现 8 大创新应用：
图1：迅数 G6 全自动菌落分析仪
1.菌落总数的自动计数
在菌落自动计数方面，我们可以处理传统的倾注法平板，涂布法平板，也可以处理螺旋接种平板和滤膜法平板；这个功能可以促进我们环境卫生、食品安全检验中“菌落总数”测定项目的自动化。自动计数菌落的速度高于 500 个菌落/秒，最小可以分辨的菌落直径可达0.03mm；可构建专用计数模板以适应复杂实验室环境，计数误差控制在 10%以内。“迅数”是采用最多的菌落仪品牌。
2.显色培养基致病菌（如大肠菌群）菌落自动计数
2008 年国家颁布了新标准 GB/T4789.3-2008《食品卫生微生物学检验-大肠菌群计数》。标准中的第 2 法-大肠菌群平板计数法，只需最少 42 小时即可得大肠菌群数。
新标准中：大肠菌群平板计数法分两步：VRBA 平板计数和 BGLB 肉汤管复发酵证实。
第一步：VRBA 培养基培养后，对平板上大肠菌群的典型菌落进行计数。计数的要求是：选取菌落数在 30 到 150 的平板，计数典型大肠菌群菌落-“紫红色，有沉淀环，且直径不小于 0.5 毫米”的菌落。
第二步：证实实验。然后将证实实验中的阳性管比例数乘以上一步计数的菌落数，再乘以稀释倍数，即得每克（或毫升）样品中大肠菌群数。
迅数全自动菌落分析仪在 GB/T4789.3-2008 新标准中的快速计数应用：迅数仪器的自动菌落计数能力可帮助实验人员快速准确选取“菌落数在 30 到 150 的VRBA 平板”；利用彩色高像素 CCD 成像及 Colonfast 图象智能识别软件，迅数菌落仪能迅速识别“紫红色，有沉淀环，且直径不小于 0.5 毫米”的大肠菌群菌落，只需 1 秒就计算出大肠菌群典型菌落数。
综上：应用新标准 GB/T4789.3-2008，结合迅数菌落分析仪，可快速测得大肠菌群典型菌落数，从而实现大肠菌群计数的快速检验。
3. 螺旋接种法的螺旋平板自动计数
螺旋接种平板计数方法是美国 FDA 从上世纪 80 年代开始采用，中国 SN行业标准-“食品和化妆品中的菌落计数检验方法-螺旋平板法”，将于 2009 年 2月 1 日正式在全国实施。仪器“螺旋接种平板分析模块”根据美国 FDA 螺旋计数法则和中国 SN 标准指导进行螺旋平板的自动分析计数。如果贵单位将来购置螺旋接种仪，将不必再重复购置螺旋菌落分析仪。
4. 培养基质控检验/菌落形态分析
仪器的菌落形态分析功能可以自动完成对平板上所有菌落的形态分析（直径，面积，圆度等）和直径分布统计，帮助微生物实验室进行培养基质量控制的生物评价（如：生长率实验，菌落平均直径/标准偏差计算等）。国内微生物培养基最高评价机构-中国药品生物制品检定所培养基室从 2004 年底就开始在使用迅数这个品牌菌落仪做培养基质量控制。
5. 3M Petrifilm 细菌总数测试片自动分析计数
6. 微生物限度检查滤膜平板自动计数
自动完成限度检查实验中滤膜法平板和培养法平板的菌落计数工作，并保留原始实验图象作为最完整的实验记录保存。
7. 管碟法/纸片法抑菌圈自动测量
管碟法/纸片法平板上的任意位置、多个抑菌圈的自动测量- 准确、客观、重现性高。
效价测定：仪器在完成抑菌圈自动测量的基础上进行抗生素的二剂量法生物效价测定。
抗生素残留测定：抑菌圈自动测量的基础上进行抗生素残留量测定。
药敏分析：仪器在完成抑菌圈自动测量的基础上与自带内置美国 CLSI 的纸片扩散法（KB 法）抗微生物药物敏感性判别标准数据库进行比对，自动完成待测菌的药敏特性判断。
β-内酰胺酶类药物（金玉兰酶）检验：迅数“抑菌圈测量”模块对单碟（每碟含 4 到 12 个抑菌圈）测量时间小于 1 秒，可在自动完成平板上多个抑菌圈准确测量的基础上结合报告“β- 内酰胺酶类药物检验结果阳性或阴性”的卫生部新标准规定，轻松实现舒巴坦敏感 β-内酰胺酶类物质是否存在的自动化分析。
8. 环境和测试用水质量控制
环境监测：空气，水，实验台表面等的细菌数量定量和实验平板图片保存
消毒监测：检验手和高压消毒物品的消毒灭菌效果的细菌定量 测试用水
质量控制：支持对含低量微生物的水样进行微生物定量的滤膜法平板计数
二 菌落计数器的应用缺点分析
目前，大多数实验室仍采用传统的人工肉眼结合菌落计数器的计数方法：借助放大镜的观察，用计数笔点击每一个菌落，计数器计数每一个点击产生的压力电子脉冲得出总数。
这样虽然成本低廉，但有以下几大缺点：
1.识别和记数错漏：所有的计数都依靠对压力脉冲产生次数的记录，不同人员的操作产生的压力不同就难免产生漏记，而且计数的结果也因操作人员对菌落的识别经验不同而产生差异 ，系统偏差较大。
2. 标记和修正不便：肉眼计数和菌落计数器计数都依靠计数笔在被统计的菌落上留下墨水笔迹来进行标记，因此在存在密集菌落的情况下就标记不便，而且发现误统计时需擦去墨水痕迹导致修正不便。
3. 效率低下：肉眼计数和菌落计数器计数都需要人工用肉眼识别每一个菌落，因此一旦样品较多就会耗费大量的时间，影响研究或是结果报告的效率。
4. 原始结果无法保存：在做完统计后，留下了一个统计数字，而对记录和验证实验结果很重要的培养平板表面菌落生长状况却因为平板的洗掉而无法保存。
三 菌落计数/分析仪的应用优势
菌落计数/分析仪器的原理是将获取的菌落图片数码化，根据菌落目标和培养基背景间的偏差（颜色和亮度差异）所显示出的数学表达不同，将目标从背景中智能识别出来。
图2：菌落计数方式的百年进化史
1. ”人工计数模式”保留了菌落计数器的工作原理和工作方式：
A.替代菌落计数器的放大镜-软件可以对获取图象做任意比率放大，观察更轻松;
B.替代菌落计数器的压力脉冲计数笔-仪器可以让我们用鼠标点击留下标记来替代脉冲笔点击留下墨水点，计数更轻松更准确更卫生。
C.仪器计数完毕自动生成报告。
2.“自动计数模式”可以自动识别、标记、计数菌落 仪器可以将平板上所有菌落的智能识别、自动标记和累加计数一次瞬间完成；可以快速完成包含细菌、霉菌、酵母菌等样品的倾注法平板、涂布法平板、滤膜法平板、空气沉降法平板、螺旋接种平板、3M 测试纸片的菌落自动计数和浓度计算；计数速度达到每秒钟500 个菌落以上，统计范围可在每平板 0 到 20000 个菌落；结合已经成熟的选择性显色培养基技术，可以快速完成大肠菌群、乳酸菌和金黄色葡萄球菌等彩色菌落的计数分析 。
3. 配备专用数据库，轻松管理每天实验数据和图片
微生物实验结束后，培养皿必须及时清洗，只留下纸质数据或笼统的语言来描述菌落特征。菌落分析仪的数据库系统不仅能保存菌落的图片，还储存了全部的统计数据，可根据名称、编号、日期等，轻松查询以往数据。
编辑：范伟伟
